• <output id="rvd5t"><small id="rvd5t"></small></output>

        <tr id="rvd5t"></tr>

          1. <th id="rvd5t"><sup id="rvd5t"></sup></th>
            免費咨詢電話: 400-699-0631      點擊這里給我發消息
             
             
             
            產品分類
             
            ·PCR
             
             





            RTD6148 RealPAGE彩色凝膠快速制備試劑盒 停產
             產品貨號: RTD6148
             產品名稱: RTD6148 RealPAGE彩色凝膠快速制備試劑盒 停產
             產品價格/規格: 125板膠
             產品說明書: 點擊查看
             更新時間: 2022-06-07
            詳細信息   訪問次數:

            • 產品介紹
            • 發表文章
            • 相關產品
            • 質檢證書
            • 該產品已經停產,替代產品RTD6132 RealPAGE plus彩色凝膠快速制備試劑盒

              RealPAGE Color Gel Fast Preparation KitRealPAGE彩色凝膠快速制備試劑盒

              ●  貨品規格:

              貨號

              說明

              制膠數量

              RTD6148-06

              制備6%PAGE

              125 0.75mm

              901 mm

              601.5 mm

              RTD6148-08

              制備8%PAGE

              RTD6148-10

              制備10%PAGE

              RTD6148-12

              制備12%PAGE

              RTD6148-15

              制備15%PAGE

              ●  貨品內容:

              組份

              貨號

              名稱

              規格

              保存

              1

              RTD6148-UA

              上層膠溶液A2×)

              80 ml

              4

              2

              RTD6148-UB

              彩色上層膠溶液B2×)

              80 ml

              4

              3

              RTD6148-LA6

              下層膠溶液A 6%2×)

              250 ml

              4

              RTD6148-LA8

              下層膠溶液A 8%2×)

              250 ml

              4

              RTD6148-LA10

              下層膠溶液A 10%2×)

              250 ml

              4

              RTD6148-LA12

              下層膠溶液A 12%2×)

              250 ml

              4

              RTD6148-LA15

              下層膠溶液A 15%2×)

              250 ml

              4

              4

              RTD6148-LB

              下層膠溶液B2×)

              250 ml

              4

              5

              RTD6148-SP

              改良型促凝劑

              8 ml

              -20

              說明書

              一份

              產品簡介:

              該產品利用聚丙烯酰胺凝膠電泳原理,采用合理設計的預混合配方和配制流程,可在15-30分鐘內配制得到高質量的聚丙烯酰胺凝膠,用于變性和非變性蛋白凝膠電泳。本產品可以配制常用分離膠濃度6%、8%、10%、12%和15%,可以滿足絕大多數蛋白電泳需求。

              本試劑盒大約可以配制60-125塊常規大。8×10cm)PAGE凝膠,具體數量根據凝膠厚度決定:0.75mm厚度凝膠可以配制125塊膠,1mm厚度凝膠可以配制至少90塊膠,1.5mm厚度凝膠可以配制至少60塊膠。

              ● 運輸和貯存:

              本產品常溫運輸;組份按照標簽溫度貯存;有效期一年。

              特點:

              1. 方便:彩色上層膠,方便上樣;上層膠溶液和下層膠溶液1:1混合,無需計算;

              2. 快速:如采用一步法制膠,可以在15分鐘內準備好凝膠。

              3. 安全:不用接觸有毒粉末;無需單獨添加有異味的TEMED。

              4. 兼容性廣:制膠溶液中不含SDS,可用于非變性電泳(Native-PAGE);

              使用說明:

              凝膠制備:

              1.1 根據下表參考選擇合適的凝膠濃度

              表一不同濃度的PAGE下層膠的最佳分離范圍

              下層膠(分離膠)濃度

              最佳分離范圍

              6%

              50-400 kD

              8%

              40-300 kD

              10%

              20-150 kD

              12%

              15-100 kD

              15%

              10-80 kD










              1.2 分步法凝膠制備:

              1.2.1 取等體積下層膠溶液B 和下層膠溶液A, 

              各2.0/2.5/4.0 ml,混勻;

              1.2.2混合溶液中加入 40/50/80 μl的促凝劑,輕輕混勻,將混勻后的溶液注入制膠玻璃板中,使液面和短玻璃板上沿之間的距離比梳齒長0.5 cm即可;注意:此溶液為過量,請勿全部注入。

              1.2.3 沿玻璃板緩慢加入適量滅菌水或無水乙醇覆蓋于下層膠之上,待下層膠凝固后,倒去上層水或乙醇;注意:當水(乙醇)和膠之間有一條折射線時,說明膠已凝固;25℃3-5分鐘可以聚合。

              1.2.4 取等體積上層膠溶液B和上層膠聚合溶液A,各0.5/0.75/1.0 ml,混勻;

              1.2.5向混合溶液中加入 10/15/20 μl 的促凝劑,輕輕混勻,插入梳齒;

              1.2.6 待上層膠凝固后,拔去梳齒即可用于電泳。

              注:凝膠的聚合時間與環境溫度有關。夏天溫度較高時,聚合較快;冬天氣溫低時,聚合時間會延長(參見表二)。

              表二 上層膠不同溫度下凝固時間參考表

              溫度

              凝固時間

              18

              30-40分鐘

              25

              10-15分鐘

              30

              8-10分鐘

              37

              5-8分鐘

              1.3 一步法凝膠制備:

              1.3.1 取等體積下層膠溶液B 和下層膠溶液A,各2.0/2.5/4.0 ml,混勻;

              1.3.2取等體積上層膠溶液B和上層膠溶液A,各0.5/0.75/1.0 ml,混勻;

              1.3.3向步驟1.3.1的混合溶液中加入 40/50/80 μl的促凝劑,輕輕混勻,將混勻后的溶液注入制膠玻璃板中,使液面和短玻璃板上沿之間的距離比梳齒長0.5 cm即可;注意:此溶液為過量,請勿全部注入。

              1.3.4 向步驟1.3.2 的混合溶液中加入10/15/20 μl 的促凝劑,輕輕混勻,無需等待下層膠凝固,即可將混勻后的溶液輕緩注入制膠玻璃板中,插入梳齒; 注意:灌注上層膠溶液一定要輕緩,

              避免將上層膠溶液沖入下層膠。

              1.3.5 待上層膠凝固后,拔去梳齒即可進行電泳。

              1:凝固后上下層膠分界線平整度略弱于分步法配制的凝膠,但對后續電泳沒有影響。

              2:凝膠的聚合時間與環境溫度有關。夏天溫度較高時,聚合較快;冬天氣溫低時,聚合時間會延長(參見表二)。

              電泳:

              2.1 SDS-PAGE變性電泳:

              2.1.1電泳緩沖液配制:

              5×Tris-甘氨酸-SDS電泳緩沖液配制方法:

              順序

              組份

              終濃度

              1

              5

              1

              甘氨酸

              0.96 M7.2 %

              72

              360

              2

              Tris

              0.125 M1.5%

              15.1

              75.5

              3

              SDS

              0.5%

              5

              25

              4

              超純水

              定容至1

              定容至5

              測定pH~8.5,不用調節pH

              用前將5×Tris-甘氨酸-SDS電泳緩沖液稀釋5倍即配成1×Tris-甘氨酸-SDS電泳緩沖液。

              2.1.2 樣品處理:融化-混合-變性-上樣

              5×蛋白上樣緩沖液(變性,還原)(自備,貨號:PL080)常溫數分鐘解凍后輕輕搖勻,以確保溶液混合均勻;將緩沖液與蛋白樣品按照1:4的比例混勻,如2 μl 5×上樣緩沖液加8 μl樣品混合;將蛋白樣品置于95℃中加熱5-10分鐘;蛋白樣品加入凝膠加樣孔內電泳。

              2.1.3 電泳過程;

              在電泳槽的內槽內加入1×Tris-甘氨酸-SDS電泳緩沖液(讓電泳緩沖液漫過加樣孔),輕輕的撥出梳子,用1ml吸頭徹底沖洗加樣孔,隨后在電泳槽外槽加入適量的1×Tris-甘氨酸-SDS電泳緩沖液,按照表三條件電泳。

              表三 SDS-PAGE電泳條件

              恒電壓

              起始電流

              結束電流

              電泳時間

              適用條件

              200 V

              37-50 mA/板膠

              14-25 mA/板膠

              35 min+

              最佳電壓,最優的分辨率

              2.2 非變性電泳(Native PAGE):

              2.2.1電泳緩沖液配制:

              5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液配制方法:

              順序

              組份

              終濃度

              1

              5

              1

              甘氨酸

              0.96 M7.2 %

              72

              360

              2

              Tris

              0.125 M1.5%

              15.1

              75.5

              3

              超純水

              定容至1

              定容至5

              測定pH~8.5,不用調節pH

              用前將5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液稀釋5倍即配成1×Tris-甘氨酸電泳緩沖液。

              2.2.2 樣品處理:融化-混合-上樣

              5×非變性非還原蛋白上樣緩沖液(自備,貨號:PL111)常溫數分鐘解凍后輕輕搖勻,以確保溶液混合均勻;將緩沖液與蛋白樣品按照1:4的比例混勻,如2 μl 5×上樣緩沖液與8 μl樣品混合;蛋白樣品加入凝膠加樣孔內電泳。注:非變性電泳樣品不能加熱處理。

              2.2.3 電泳過程;

              在電泳槽的內槽內加入1×Tris-甘氨酸電泳緩沖液(讓電泳緩沖液漫過加樣孔),輕輕的撥出梳子,用1 ml吸頭徹底沖洗加樣孔,隨后在電泳槽外槽加入適量的1×Tris-甘氨酸電泳緩沖液,按照表四條件電泳。

              表四 Native PAGE電泳條件

              恒電壓

              起始電流

              結束電流

              電泳時間

              適用條件

              200 V

              35-40 mA/板膠

              14-20 mA/板膠

              40-50 min

              最佳電壓,最優的分辨率

              . 染色:

              1. 將電泳后的PAGE膠取下放入塑料容器中,加入適量FastBlue蛋白染色液(以剛剛覆蓋過膠面為適),條帶1-2分鐘(蛋白含量在2 μg以上)即可見。

              2. 搖床常溫搖動10-15分鐘至條帶清晰可見。

              3. 加入適量蒸餾水脫色,期間更換1-2次蒸餾水,搖床常溫搖動10-15分鐘至背景干凈。

              4. 觀察保存結果。

              . 實驗示例:

               

                                                   8%膠非變性電泳 1×TG 200V 37-14mA 50min   


              10%膠變性電泳 1×TGS  200V 37-14mA 50min



            TOP】【打印本頁】【關閉窗口



            中科瑞泰(北京)生物科技有限公司 版權所有 京ICP備12052607 網站管理   快遞查詢   IF查詢
            電話:010-58437227 免費電話:400-699-0631 傳真:010-57909566
            點擊這里給我發消息   內勤訂貨QQ:2446698252   技術支持QQ:460449375 電子郵箱:real-times@vip.163.com
            注意:公司所有產品僅供科研使用
            _×
            在線咨詢
            99久热精品免费观看_潮喷失禁大喷水av无码_中国女人free性hd_国产人A片视频在线播放