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            RTT2103 DNase I溶液(蛋白提取用)
             產品貨號: RTT2103
             產品名稱: RTT2103 DNase I溶液(蛋白提取用)
             產品價格/規格: 10KU 300元
             產品說明書: 點擊查看
             更新時間: 2022-03-22
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            • DNase I溶液(蛋白提取用)

              DNase I Solutionfor protein isolation

               

              ●     產品組成:

              貨號

              名稱

              規格

              RTT2103-01

              DNase I粉末

              10 KU

              RTT2103-02

              DNase I溶解液

              5 ml

              RTT2103-03

              1M MgCl2

              5 ml

              ● 保存:-20℃粉末未配制有效期3年;DNaseI配制成溶液后-20℃有效期一年。

              產品簡介:

              脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一種非特異性核酸酶切酶,可用于降解單鏈或雙鏈DNA,其原理為DNaseⅠ水解磷酸二酯鍵產生帶有5'-磷酸基團和3'-OH的單核苷酸或寡核苷酸。   本產品能迅速水解核酸,降低粘度以減少處理時間和增加蛋白產量。該酶可以與細菌蛋白提取液和RIPA 裂解液等蛋白抽提試劑配合使用。

              本產品RNase活性未檢測,不能用于反轉錄反應(RT-PCR)中DNA的去除使用。RT-PCR中DNA污染的去除請選擇RNase-free DNase I(貨號:RTT2014)。

              活性定義:

              One unit of the enzyme completely degrades 1 μg of DNA in 10 min at37°C. 

              DNaseI溶解液組份:

              20 mMsodium acetate pH 6.5, containing5 mMCaCl2 and 0.1 PMSF, 50% (v/v) glycerol

              DNaseI失活或抑制:

              加入EDTA至終濃度為2.5mM后,65℃加熱10分鐘可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑,達到毫摩爾/升濃度的鋅離子,0.1%的SDS,DTT、巰基乙醇等還原劑,50-100mM以上鹽濃度均對DNase I有顯著抑制作用。

              使用方法:

               1、DNase I溶液的配制:取5ml DNase I溶解液全部加到DNase I粉末中,充分混勻,配成濃度為2000U/ml DNase I溶液。-20℃貯存。

              2、蛋白提取液中按照1/100 體積加入DNase I溶液(使其終濃度為20U/ml),1/100體積加入1MMgCl2,37℃處理30-60分鐘。

                 注:由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除EDTA,否則會降低DNase的消化能力。

              3、繼續后續蛋白提取實驗。


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