Hochest 33342染色液

Hochest 33342 Stain Solution,10 μg/ml

●  產品組成：

● 產品簡介：

Hoechst 33342，也稱bisBenzimide H 33342 或HOE 33342，是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。Hoechst 33342 染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33342也常用于普通的細胞核染色，或常規的DNA 染色。Hoechst 33342 的最大激發波長為346nm，最大發射波長為460nm；Hoechst 33342 和雙鏈DNA 結合后，最大激發波長為350nm，最大發射波長為461nm。本Hoechst 33342

染色液為即用型，濃度為10 μg/ml，可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。

● 貯存：

-20℃避光保存，一年有效。

● 操作步驟：

1. 對于固定的細胞或組織：

1.1 對于細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst 33342 染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續的Hoechst33342 染色。

1.2 對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst 33342 染色液，覆蓋住樣品即可；對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品3 倍體積的染色液，混勻。室溫放置3-5 分鐘。

1.3 吸除Hoechst 33342 染色液，用TBST、PBS 或生理鹽水洗滌2-3 次，每次3-5 分鐘。

1.4 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發生凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。

2. 對于活細胞或組織：

2.1 加入適當量Hoechst 33342 染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對于六孔板一個孔需加入1ml 染色液，對于96 孔板一個孔需加入100 微升染色液。

2.2 在適宜于細胞培養的溫度下培養20-30 分鐘。棄染色液，用PBS 或培養液洗滌2-3 次即可進行熒光檢測。

● 注意事項：

熒光染料都存在淬滅的問題，為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。建議染色后盡量當天完成檢測，活細胞或組織染色后應立即觀察。