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            RTE3105 Annealing Buffer for DNA Oligos 退火緩沖液(5×)
             產品貨號: RTE3105
             產品名稱: RTE3105 Annealing Buffer for DNA Oligos 退火緩沖液(5×)
             產品價格/規格: 5×1ml 200元
             產品說明書: 點擊查看
             更新時間: 2022-03-22
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              貨號

              名稱

              規格

              貯存

              RTE3105

              DNA退火緩沖液(5×)

              5×1ml

              -20

              保存:-20

              產品簡介:

              DNA寡核苷酸退火緩沖液(Annealing Buffer for DNA Oligos)簡稱為DNA退火緩沖液,是一種可用于DNA oligo退火的緩沖液,可用于常規的DNA oligo的退火,尤其適合于較難退火的用于RNAi (也稱siRNA)質粒構建的DNA oligo的退火。該緩沖液能有效避免DNA oligo自身形成發夾結構,并且兩條oligo退火后可以直接和經酶切、純化的質粒連接,轉化后可以得到大量的陽性克隆。

              本試劑操作簡單,只需把待退火的DNA oligo和退火緩沖液按照一定比例混合后,置于PCR儀上進行程序降溫,約90min即可完成。

              操作步驟(僅供參考):

              1、 把待退火的DNA oligo用經滅菌水配制成50μM,同時徹底溶解退火緩沖液(5×)備用。

              2、 按如下反應體系操作:

              順序

              組份

              體積

              1

              滅菌水

              40μl

              2

              退火緩沖液(5×)

              20μl

              3

              DNA oligo A(50μM)

              20μl

              4

              DNA oligo B(50μM)

              20μl

               

              Total

              100μl

              按照上述順序,依次加入并混勻,如果所用PCR儀沒有加熱蓋,可加入Mineral Oil防止液體揮發。

              3、 按如下PCR儀的退火條件:

              步驟

              溫度

              時間

              作用

              1

              95℃

              2min

              Oligo充分變性

              2

              90s下降1℃,降至25℃

              90min

              程序退火

              3

              -20℃

              長期保存

              暫時存放

              注:如果使用的PCR儀無梯度降溫功能,也可以95℃處理后自然冷卻至常溫。


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